Caracterización de enzimas digestivas y digestibilidad in vitro en adultos de la pigua Macrobrachium Carcinus

Abstract

El presente trabajo se dividió en dos partes: la primera parte comprende la caracterización de enzimas digestivas presentes en crustáceos adultos de Macrobrachium carcinus. La segunda parte consistió en la evaluación in vitro de la digestibilidad alcalina usando extractos multienzimáticos de M. carcinus mediante el método de pH-Stat de 10 ingredientes de origen animal y vegetal con diferentes porcentajes de proteína cruda, utilizadas en la elaboración de dietas para crustáceos, se utilizó como control la caseína de Hammerstein, se cuantificaron los aminoácidos liberados durante la hidrólisis y el seguimiento de hidrólisis proteica mediante la técnica de SDS-PAGE. Se aplicó análisis de varianza de una vía, pruebas de Kruskal-Wallis y Tukey. La tasa de liberación de aminoácidos se calculó por medio del programa estadístico STATISTICA v 7.0. La representación gráfica de los resultados en las actividades enzimáticas se realizó mediante el programa Sigma Plot versión 10.0. La actividad proteolítica de M. carcinus se lleva a cabo de manera óptima a rango de pH de 8 a 10 y una temperatura de 45ºC, actividad que es inhibida totalmente por PMSF (inhibidor general de proteasas alcalinas) y en su mayoría por SBT1 (inhibidor trípsico de soya), lo que indica que la actividad proteolítica en los extractos de M. carcinus se da debido a la tripsina. Los ingredientes alimenticios utilizados, especialmente los de origen animal marino, mostraron alto grado de hidrólisis (P=0.05) utilizando los extractos enzimáticos de adultos, además se mostró buena afinidad para la hidrólisis de ingredientes de origen animal terrestre y ligeramente más bajo los de origen vegetal. La electroforesis y la cuantificación de aminoácidos libres denotaron las mayores concentraciones en el hidrolizado de pescado; sin embargo, el mejor ingrediente fue la levadura para panadería por ser el que presentó el mayor grado de hidrólisis y debido también a que fue uno de los que proporcionó la mayor cantidad de aminoácidos libres totales, solo precedido por el hidrolizado de pescado. La combinación de estudios de caracterización enzimática con las pruebas de digestibilidad in vitro pueden contribuir al diseño de dietas adecuadas para la reproducción y cultivo intensivo de M. carcinus.