Obtención del péptido recombinante abaecina de Apis mellifera

Abstract

La abeja Apis mellifera es un organismo que pertenece al orden Hymenoptera, presenta dos pares de alas membranosas, un par de antenas y tres pares de patas; presenta una metamorfosis holometábola y cumple un rol importante en la polinización de especies de interés agrícola jugando un papel económico y ecológico. Esta especie ha presentado una alta disminución en su población, este fenómeno es conocido como el Trastorno del Colapso de la Colmena donde diferentes factores como la pérdida de su hábitat, el uso excesivo de pesticidas y plaguicidas, los efectos del cambio climático y enfermedades causadas por endo y ectoparásitos como Nosema ceranae y Varroa destructor. Uno de los mecanismos utilizados por las abejas contra el combate de agentes patógenos está mediado por péptidos antimicrobianos (AMPs). Uno de ellos es el péptido antimicrobiano abaecina que se acumula en la hemolinfa de las abejas y se conoce que es de amplio espectro. En este estudio nos enfocamos en la obtención del péptido recombinante abaecina de A. mellifera. El análisis in silico y modelado de la estructura terciaria reveló que es un péptido con estructura alfa hélice, con un peso de 11 kDa. La secuencia codificante para abaecina se clonó de manera exitosa en el vector de almacenamiento pJET1.2/blunt y se subclonó en el vector de expresión pQE80L. El péptido recombinante abaecina fue expresado en células Escherichia coli M15 con la adición del compuesto IPTG. El péptido abaecina se encontró en la fracción soluble lo que permitió purificarlo en condiciones nativas. Abaecina recombinante fue detectada mediante western blot en un peso aproximado de 20 kDa, lo que sugiere que forma dímeros.